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草甘膦的測試方法

點(diǎn)擊次數(shù):2043 發(fā)布時間:2015-06-16

1     壓液相色譜法

1.1   范圍

    本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用壓液相色譜法測定飲用水及其水源水中草甘膦和氨甲基膦酸。

本法適用于生活飲用水及其水源水中草甘膦和氨甲基膦酸的測定。

本法草甘膦和氨甲基膦酸的zui低檢測質(zhì)量均為5.0ng。若取200uL直接進(jìn)樣則zui低檢測質(zhì)量濃度均為25μg/L。

目前未見有基質(zhì)干擾的報道。草甘膦可在氯消毒過的水中降解。草甘膦在礦物和玻璃表面有吸附作用。

1.2    原理

采用陰離子或陽離子交換色譜法分離草甘膦和氨甲基膦酸,經(jīng)過柱后衍生,用熒光檢測器檢測。柱后衍生反應(yīng)為用此氯酸鹽溶液將草甘膦氧化成氨基乙酸;然后氨基乙酸與鄰苯二醛(OPA)和2-巰基乙醇(MERC)的混合液反應(yīng),形成一種光的異吲哚產(chǎn)物。氨甲基膦酸可直接與OPA/MERC混合液反應(yīng),在次氯酸鹽存在下,檢測靈敏度會下降。

1.3    材料與試劑

1.3.1  水:用純水系統(tǒng)生產(chǎn)的水或HPLC水。

1.3.2  磷酸(ρ20 =1.69g/mL):R304

1.3.6  磷酸二氫鉀:R311

1.3.7  乙二胺四乙酸二鈉溶液:將0.37g的乙二胺四乙酸二鈉(Na2-EDTA• 2H2O)加入1L純水中配置溶度為0.001mol/L的溶液,并經(jīng)0.22μm或0.45μm的濾膜過濾。

1.3.8  氯化鈉:R313

1.3.10  次氯酸鈣:R303

1.3.11  氧化試劑:見試劑盒(P/N:R300-01)操作手冊

1.3.12  鄰苯二醛(OPA):R301

1.3.13  2-巰基乙醇(MERC):R302

1.3.14  硼砂:R312

1.3.16  熒光標(biāo)記溶液:見試劑盒(P/N:R300-01)操作手冊

1.3.17  草甘膦:純度≥99%。

1.3.18  甲基膦酸:純度≥99%。

1.4    儀器設(shè)備

1.4.1  壓液相色譜儀:附熒光檢測器。

1.4.2  色譜柱:A72545, Comatex SAX, 250X4.6mm,5um

1.4.3  柱后反應(yīng)器:CoM6000PCR雙衍生系統(tǒng)

1.5    樣品

1.5.1  樣品的性質(zhì)

1.5.1.1  樣品的名稱:水樣。

1.5.1.2  樣品采集后應(yīng)用聚丙烯容器儲存,加入100mg/L的硫代硫酸鈉可消除氯帶來的影響。樣品應(yīng)儲存在4℃、避光的環(huán)境中,并在2周內(nèi)測定。

1.5.2  樣品預(yù)處理

1.5.2.1樣品濃度≥25μg/L時,不需濃縮,取9.9mL的樣品和0.1mL 0.1mol/L的EDTA,經(jīng)0.22μm或0.45μm的濾膜過濾,進(jìn)樣200μL。

1.5.2.2  樣品濃度低于檢出*需要對樣品進(jìn)行濃縮,取500mL水樣,若為懸浮液,將樣品通過粗濾膜過濾,取250mL移至500mL圓底瓶中,加5mL鹽酸(18.1.3.4)于燒瓶中,5mL鹽酸(18.1.3.4)于剩余樣品中。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮,緩慢升溫從20℃到60℃。在*部分*蒸發(fā)前,加入剩余樣品和2次5mL清洗液,蒸干,若必要,用干氮去除zui后的痕量水。取2.9mL流動相(若必要調(diào)節(jié)PH=2)和0.1mL0.03mol/L的EDTA溶解殘留。過0.45μm濾膜,進(jìn)樣。

1.6    分析步驟

1.6.1  儀器的調(diào)整

1.6.1.1  流動相: 見試劑盒(P/N:R300-01)操作手冊

1.6.1.2  柱溫:50℃。

1.6.1.3  流速:1.0mL/min。

1.6.1.4  熒光檢測器:激光波長Ex=230nm(氘)、340nm(石英鹵素或氙),發(fā)射波長Em=420nm~455nm

1.6.1.5  柱后反應(yīng)條件

1.6.1.5.1  氧化劑流速:0.5mL/min。

1.6.1.5.2  OPA-MERC溶液:流速0.5mL/min。

1.6.2  校準(zhǔn)

1.6.2.1  定量分析中的標(biāo)準(zhǔn)方法:外標(biāo)法。

1.6.2.2  標(biāo)準(zhǔn)樣品

1.6.2.2.1  草甘膦和氨甲基磷酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:用水配置草甘膦、氨甲基膦酸均為0.1mg/mL儲備溶液。稀釋儲備液配置溶度為10μg/mL、1.0μg/mL系列工作液。儲存于聚丙烯瓶中,冰箱保存。每月重配置。

1.6.2.2.2  草甘膦和氨甲基磷酸HPLC校準(zhǔn)溶液:用0.001mol/L EDTA二鈉溶液配置草甘膦、氨甲基磷酸溶度為0.11mg/mL 儲備液。稀釋儲備液配置0、0.025、0.05、0.10、0.50、1.00μg/mL標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。儲存于聚丙烯瓶中,冰箱保存。每月重配置。

1.6.2.2.3  標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)的表示:用標(biāo)準(zhǔn)曲線計算測定結(jié)果。

1.7  定量分析 

取200μL水樣注入色譜儀,測量峰或峰面積。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸分析計算草甘膦和氨甲基磷酸的濃度。濃縮樣品可通過濃縮因子(500mL原始樣品/3mL),確定原始水樣濃度。

1.8  度和度

對樣品(加標(biāo)濃度0.5μg/L~5000μg/L)重復(fù)測定六次,草甘膦的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為12%~20%,平均標(biāo)準(zhǔn)偏差為15%。氨甲基膦酸的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.6%~29%,平均標(biāo)準(zhǔn)偏差為14.5%.草甘膦的加標(biāo)回收率為94.6%~120%,平均回收率104%。氨甲基膦酸的回收率為86.0%~100%,平均回收率為93.1%。

 

 

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